1 背景

本文詳述了嚙齒類動(dòng)物手術(shù)過程中需要遵守的操作原則，在IACUC方案中列出了相關(guān)替代流程的操作可除外。實(shí)驗(yàn)研究者有責(zé)任確保動(dòng)物得到充足的麻醉/術(shù)后護(hù)理，提供護(hù)理的人員必須熟悉方案流程，同時(shí)具備進(jìn)行如下所示評估的技能和能力，并且必須能夠在發(fā)生術(shù)后并發(fā)癥時(shí)提供充足的獸醫(yī)支持。值得注意的是，以下的這些原則描述的均是最低標(biāo)準(zhǔn)。

2 麻醉和鎮(zhèn)痛

嚙齒類動(dòng)物麻醉指南和要求需在嚙齒類動(dòng)物麻醉護(hù)理的SOP中概述。除非有充足的理由，所有手術(shù)的鎮(zhèn)痛給藥應(yīng)在術(shù)前或術(shù)中開始，并持續(xù)至術(shù)后至少24小時(shí)。需要局部麻醉時(shí)，應(yīng)在組織切開前注射局部麻醉劑，利多卡因在注射2-5min內(nèi)起效，布比卡因在注射15min內(nèi)起效。

3 手術(shù)區(qū)域準(zhǔn)備

嚙齒類動(dòng)物手術(shù)操作區(qū)域必須位于設(shè)施內(nèi)不同時(shí)開展其他活動(dòng)的區(qū)域。使用前該區(qū)域必須清潔并保持整潔，所有物品、設(shè)備表面均應(yīng)清潔和消毒。

4 器械和創(chuàng)巾準(zhǔn)備

• 手術(shù)前必須采用可接受的方法對手術(shù)器械進(jìn)行滅菌，方法包括高壓滅菌、環(huán)氧乙烷滅菌和特定的冷滅菌技術(shù)，單獨(dú)使用酒精不是可接受的滅菌方法。

• 滅菌器的功能以及器械包的無菌性確認(rèn)必須按照高壓滅菌器監(jiān)測和無菌包裝儲(chǔ)存標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

• 手術(shù)過程中，可使用熱珠滅菌器對器械進(jìn)行重復(fù)滅菌：使用無菌紗布擦拭器械上的所有有機(jī)材料后，將其放入微珠中30-45秒，此操作最多用于4只動(dòng)物的手術(shù)器械滅菌，后續(xù)就必須拆用新的手術(shù)器械包。

• 所有的植入物（微型泵、導(dǎo)管、縫合材料）必須無菌。

• 應(yīng)使用無菌鋪巾覆蓋未剃毛的區(qū)域，鋪巾可接受的材料包括棉布、透明粘性鋪巾和大紗布方塊。另外還需建立手術(shù)器械的無菌區(qū)域，以防污染。

5 手術(shù)人員準(zhǔn)備

所有手術(shù)人員必須戴口罩和手術(shù)帽，口罩將口鼻完全罩住，手術(shù)帽需將所有的頭發(fā)包裹。手部刷洗完畢后，穿無菌手術(shù)服，戴無菌手套（不能接觸手套的外表面）。整個(gè)過程保持器械和手套的無菌。

6 動(dòng)物準(zhǔn)備

• 手術(shù)因麻醉時(shí)間、體腔暴露面積等原因，易出現(xiàn)術(shù)中體溫變化，需額外提供溫水毯等保溫措施。

• 雙眼涂抹眼膏，防止角膜干燥。

• 必須清除切口周圍區(qū)域的所有毛發(fā)，可以使用剃毛刀或脫毛膏（使用不當(dāng)可導(dǎo)致皮膚的化學(xué)燒傷），脫毛的區(qū)域需要足夠大，以防器械或縫線接觸到未備好的皮膚。

• 對切口部位進(jìn)行手術(shù)部位準(zhǔn)備：（注：僅用酒精不能滿足切口的消毒需求），從手術(shù)切口部位開始向外旋轉(zhuǎn)，以環(huán)形方式，使用碘伏或氯己定紗布進(jìn)行消毒，每次使用后，丟棄紗布，重復(fù)至少三次。注意避免使用酒精等抗菌劑過度濕潤手術(shù)區(qū)域，可能會(huì)加劇體溫的丟失，造成低體溫。

7 切口閉合

• 必須至少分兩層閉合體腔（體壁和皮膚）。

• 為防止動(dòng)物撕咬傷口裂開，除非方案另有說明，否則必須采用簡單間斷縫合方式閉合傷口。

• 也可以使用傷口夾、組織膠閉合皮膚，注意涂膠過多是導(dǎo)致動(dòng)物自殘和傷口裂開的常見原因。外部縫線必須是單股材料，以防止毛細(xì)作用及可能的傷口感染。

8 術(shù)后護(hù)理

• 動(dòng)物蘇醒后，將動(dòng)物送回籠中飼養(yǎng)，除非方案另有說明。作為支持性治療計(jì)劃的一部分，可提前24-48小時(shí)將食物置于籠盒中。

• 研究人員應(yīng)第二天一早檢查動(dòng)物狀態(tài)，之后至少每天檢查一次，持續(xù)7-10天，直至拆除縫線或傷口夾，確保動(dòng)物可正常進(jìn)食、飲水、活動(dòng)和走動(dòng)。

• 檢查手術(shù)切口部位是否有透明或膿性分泌物、發(fā)紅、腫脹、動(dòng)物撕咬或傷口裂開。

• 若出現(xiàn)感染、疝氣、器官功能障礙等并發(fā)癥，及時(shí)咨詢獸醫(yī)。除非方案中有描述，否則未經(jīng)獸醫(yī)人員確認(rèn)，不允許進(jìn)行修復(fù)手術(shù)。事先未獲得批準(zhǔn)而進(jìn)行的修復(fù)代表二次手術(shù)和不合規(guī)事件。

• 任何異常（例如脫水、嗜睡、食欲不振）均需要咨詢獸醫(yī)進(jìn)行支持治療，并持續(xù)頻繁的監(jiān)測和護(hù)理。如果動(dòng)物得到了適當(dāng)及時(shí)的治療，但癥狀持續(xù)惡化，則需要考慮對其進(jìn)行安樂。

9 記錄保存

必須保存每只或每籠動(dòng)物的手術(shù)記錄。建議使用手術(shù)記錄卡，信息包括日期、手術(shù)名稱、使用的麻醉劑和鎮(zhèn)痛藥以及給藥時(shí)間、術(shù)后的監(jiān)測記錄。動(dòng)物監(jiān)測期間記錄卡必須固定在籠盒上，最終由實(shí)驗(yàn)室按照相關(guān)法規(guī)作為永久記錄保存。

10 非存活手術(shù)

• 建議提供額外的熱量來穩(wěn)定動(dòng)物的麻醉狀態(tài)，但不做嚴(yán)格要求。

• 所有的手術(shù)器械和植入物必須潔凈，但不一定無菌。對于>4小時(shí)的長時(shí)間手術(shù)，建議使用無菌器械，以避免與細(xì)菌污染相關(guān)的炎癥。

• 手術(shù)區(qū)域必須剔除毛發(fā)，但該部位不需要無菌清洗。

• 術(shù)者可以穿戴新的檢查手套，而非無菌手套。

參考文獻(xiàn)：

Principles of Rodent Surgery.  IACUC of WAYNE STATE UNIVERSITY.  12/2019