孕 鼠
1. 見(jiàn)栓鼠、孕鼠、見(jiàn)栓孕鼠的區(qū)別?
A. 見(jiàn)栓鼠
動(dòng)物合籠后12小時(shí)觀察見(jiàn)栓(一般操作方式:前一天下午五、六點(diǎn)鐘合籠,第二天早上七點(diǎn)鐘檢查陰栓。大鼠因?yàn)殛幩〞?huì)脫落,需要在見(jiàn)栓盒中1:1合籠;小鼠無(wú)需見(jiàn)栓盒),凡是觀察到陰栓的鼠即為見(jiàn)栓鼠。公司售出的見(jiàn)栓鼠不保證100%懷孕,封閉群的大小鼠可以保證75%的懷孕率,近交系大小鼠只保證見(jiàn)栓。斯克貝斯生物將見(jiàn)栓鼠見(jiàn)栓當(dāng)日記作“1天孕”,有的單位也有記為0.5天。
B. 孕鼠
主要針對(duì)13天(含)以上孕齡的大小鼠孕鼠。大鼠可以通過(guò)觸診感覺(jué)到胎兒,從而判斷懷孕;小鼠很難觸診到胎兒,主要依靠腹圍變化來(lái)界定是否懷孕,因此對(duì)于要求懷孕13天左右小鼠的訂單,有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)一點(diǎn)差錯(cuò)。不要求準(zhǔn)確孕齡的,我們提供的孕鼠孕齡上下相差5天(一般出售13-17天孕鼠);孕12天之前不保證懷孕,18天(含)以上的孕鼠運(yùn)輸路上可能因應(yīng)激而早產(chǎn)。
C. 見(jiàn)栓孕鼠
對(duì)于客戶提出的要求孕齡準(zhǔn)確的大小鼠,我們稱之為見(jiàn)栓孕鼠或者準(zhǔn)確懷孕日齡鼠。需要下特殊訂單,單獨(dú)安排動(dòng)物合籠。
2. 關(guān)于孕鼠的判斷和懷孕率說(shuō)明
一般通過(guò)觀察陰栓和動(dòng)物腹圍的變化來(lái)判斷動(dòng)物是否懷孕,動(dòng)物合籠后檢查到陰道栓的當(dāng)天記為妊娠第1天(有的單位也記作0.5天),對(duì)于屏障內(nèi)飼養(yǎng)的動(dòng)物,見(jiàn)栓13天之后的大鼠可以通過(guò)觸診來(lái)判定是否懷孕;見(jiàn)栓13天之后的小鼠通過(guò)觀察其腹部的隆起來(lái)判定是否懷孕;在此之前,只能通過(guò)觀察陰道栓的有無(wú)來(lái)界定是否懷孕。
備注:
由于動(dòng)物個(gè)體的差異,我們不能保證仔鼠精確的出生日期和仔鼠數(shù)量。
3. SD大鼠產(chǎn)仔量多少?如何早期判斷孕鼠?
(1)拿永久同居的SD大鼠來(lái)說(shuō),胎間隔一般在24-28天,平均產(chǎn)仔10只/胎;一年四季是恒定的。
(2)一般情況下是通過(guò)查看陰栓、腹圍增大有膨脹感、體重增加速度快、行動(dòng)逐漸遲緩等來(lái)界定是否懷孕,多年經(jīng)驗(yàn)的飼養(yǎng)員在懷孕的第10-12天通過(guò)觸診可以作出判斷,一般飼養(yǎng)員要求在第13天以上作出正確判斷即可。
4. 是否可以根據(jù)胚胎的大小和發(fā)育程度來(lái)判胚胎的天數(shù)?
從理論上講是可以的,因?yàn)榕咛グl(fā)育有一定的規(guī)律可循(下表是大小鼠不同胚胎發(fā)育階段的特征)。
但是從實(shí)際剖檢情況看,準(zhǔn)確判定很困難,有兩方面的原因:
(1)對(duì)大小鼠而言,19-21天的妊娠期只是表示出生相對(duì)集中的時(shí)間段,會(huì)有極小部分個(gè)體在妊娠期18天或者22天出生,要注意這一前一后的間隔就差了4天。假定我們認(rèn)為大小鼠出生/分娩時(shí)的發(fā)育程度是相同的,而妊娠期長(zhǎng)短的不同就可以反推即使相同孕齡的大小鼠,其發(fā)育程度也會(huì)不同。這種情況下,由于無(wú)法確切知道這只動(dòng)物的最終妊娠期會(huì)是多少天,因此無(wú)法從胚胎大?。ɑ虬l(fā)育程度)反推大小鼠的孕齡;
(2)對(duì)胚胎發(fā)育程度而言,有時(shí)候由于個(gè)體差異原因(例如母鼠自身原因、營(yíng)養(yǎng)狀況、胚胎數(shù)量的多少、胚胎發(fā)育快慢)對(duì)胚胎大小造成的影響要比孕齡長(zhǎng)短對(duì)胎鼠大小的影響更為顯著,從這個(gè)意義上說(shuō),根據(jù)胎鼠大小反推孕齡也是不準(zhǔn)確的。
ICR Mice E11-18 Comparison
不同日齡小鼠胚胎發(fā)育的形態(tài)
小鼠和人類胚胎發(fā)育的形態(tài)比較 (Xue et al., 2013)。小鼠胚胎期(塞勒爾期,Theiler stages或TS期)是基于體節(jié)特征和數(shù)量而劃分的。從受精到出生,大約是受精后20天(dpc),共有28個(gè)TS階段。上圖僅顯示了11個(gè)階段。人類胚胎階段由華盛頓卡內(nèi)基研究所(Carnegie Institution of Washington)描述,基于發(fā)育結(jié)構(gòu),而不是大小或發(fā)育天數(shù)。23個(gè)“卡內(nèi)基階段”(Carnegie stages, CS)僅涵蓋人類胚胎發(fā)育的前60天,此后,胚胎一詞被“胎兒”代替。此處顯示了4-9周的5個(gè)人類胚胎。雙向箭頭指向器官發(fā)生類似階段的人類和小鼠胚胎。
1) 經(jīng)典的小鼠胚胎發(fā)育圖譜
Karl Theiler : The House Mouse - Atlas of Embryonic Development. 1989
https://www.emouseatlas.org/emap/ema/theiler_stages/house_mouse/book.html
2) 持續(xù)更新的小鼠發(fā)育在線圖譜
新南威爾士大學(xué) - Mouse Development
https://embryology.med.unsw.edu.au/embryology/index.php/Mouse_Development
3) 受精48小時(shí)內(nèi)的單細(xì)胞層次胚胎發(fā)育過(guò)程
McDole et al. In Toto Imaging and Reconstruction of PostImplantation Mouse Development at the SingleCell Level. 2018, Cell 175, 859–876.
https://doi.org/10.1016/j.cell.2018.09.031
5. 訂購(gòu)胎鼠大小與往常不同,可能原因有哪些?是否可以要求補(bǔ)貨?
(1)公司可以確保見(jiàn)栓孕鼠的準(zhǔn)確日齡,但是不能保證胎鼠的大小和數(shù)量。
(2)一般情況下,胚胎的大小與日齡正相關(guān),與胚胎數(shù)量反相關(guān),其中胚胎數(shù)量影響更大。
(3)即使日齡和胚胎數(shù)量相同,由于個(gè)體差異的存在,胚胎大小和發(fā)育程度也可能不同;同一只動(dòng)物,胚胎在子宮內(nèi)的著床位置不同也可導(dǎo)致胚胎發(fā)育程度和體形大小不同。
(4)大小鼠在胚胎發(fā)育過(guò)程中,存在胚胎滯育的現(xiàn)象。但是現(xiàn)有手段無(wú)法預(yù)測(cè)滯育時(shí)間的長(zhǎng)短,現(xiàn)有資料還不能解釋胚胎滯育現(xiàn)象出現(xiàn)的原因。
(5)客戶不能以此為理由,要求公司補(bǔ)貨。
乳 鼠
1. 乳鼠具體指出生幾天的乳鼠?
乳鼠,顧名思義是處于哺乳期中的大小鼠,一般出生0-20天的大小鼠均叫乳鼠。一般生產(chǎn)單位都是在3周時(shí)離乳。
豚鼠因?yàn)槭峭沓尚蛣?dòng)物,哺乳期相對(duì)較短,一般1周左右離乳。
2. 出生后的乳鼠,一般幾天可以區(qū)分性別?
這取決于相關(guān)人員的工作經(jīng)驗(yàn),技術(shù)熟練的人可在出生2-3天區(qū)分性別,不過(guò)難度較大,容易出錯(cuò)。目前多數(shù)生產(chǎn)單位是在動(dòng)物3周離乳時(shí)區(qū)分動(dòng)物性別并分籠飼養(yǎng)。
3. 收到的24小時(shí)乳鼠有一只異?;蛩劳?,是怎么回事?
因?yàn)槿槭笞陨韹赡?,?duì)外界環(huán)境的刺激非常敏感,24小時(shí)以內(nèi)的乳鼠在運(yùn)輸過(guò)程中可能出現(xiàn)意外,難以預(yù)測(cè)。
4. 購(gòu)買幾天的乳鼠可以養(yǎng)活?
對(duì)于未離乳的鼠:16天以內(nèi)的乳鼠,沒(méi)有母乳的情況下成活率基本是零(人工哺乳的情況除外);16-18天的乳鼠可以采食一部分軟料,成活率相對(duì)高一點(diǎn),但是會(huì)出現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)不良的現(xiàn)象;18天以上的乳鼠基本都能成活。
5. C57BL/6母鼠不帶乳,導(dǎo)致生下的仔鼠死亡,怎么辦?
母鼠生仔后,對(duì)外界的刺激非常敏感,當(dāng)其感到危險(xiǎn)時(shí),會(huì)出現(xiàn)不哺乳現(xiàn)象,更有甚者會(huì)產(chǎn)生本能地保護(hù)反應(yīng)而將幼仔吃掉!因此需要注意外界干擾因素的排除:例如不能頻繁前去觀察、不能用手接觸幼仔、外界噪音不能過(guò)大、出生后的第一周不要更換墊料等。細(xì)節(jié)注意到了,問(wèn)題通常就能解決了。
6. 剛離乳的大小鼠是否比成年鼠死亡率高?
是的。剛離乳的大小鼠抵抗力較成年鼠低,因此對(duì)環(huán)境溫濕度等的要求更為苛刻。
參考資料
Xue et al. Global expression profiling reveals genetic programs underlying the developmental divergence between mouse and human embryogenesis. BMC Genomics 2013, 14:568
http://www.biomedcentral.com/1471-2164/14/568