實驗動物常需要標記以示區(qū)別。編號的方法很多,根據動物的種類數量和觀察時間長短等因素來選擇合適的標記方法。
(一)掛牌法:將號碼烙壓在圓形或方形金屬牌上(最好用鋁或不銹鋼的,它可長期使用不生銹),或將號碼按實驗分組編號烙在栓動物頸部的皮帶上,將此頸圈固定在動物頸部。該法適用于狗等大型動物。
(二)打號法:用刺數鉗(又稱耳號鉗)將號碼打在動物耳朵上。打號前用蘸有酒精的棉球擦凈耳朵,用耳號鉗刺上號碼,然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。該法適用于耳朵比較大的兔、狗等動物。
(三)針刺法:用七號或八號針頭蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等處刺入皮下,在受刺部位留有一黑色標記。該法適用于大小鼠、豚鼠等。在實驗動物數量少的情況下,也可用于兔、狗等動物。
(四)化學藥品涂染動物被毛法:經常應用的涂染化學藥品有
涂染紅色:0.5%中性紅或品紅溶液。
涂染黃色:3-5%苦味酸溶液。
涂染黑色:煤焦油的酒精溶液。
根據實驗分組編號的需要,可用一種化學藥品涂染實驗動物背部被毛就可以。如果實驗動物數量較多,則可以選擇兩種染料。該方法對于實驗周期短的實驗動物較合適,時間長了染料易退掉;對于哺乳期的子畜也不適合,因母畜容易咬死子畜或把染料舔掉。
(五)剪毛法:該法適用于大、中型動物,如狗、兔等。方法是用剪毛刀在動物一側或背部剪出號碼,此法編號清楚可靠,但只適于短期觀察。
(六)打孔或剪缺口法:可用打孔機在兔耳一定位置打一小孔來表示一定的號碼。如用剪子剪缺口,應在剪后用滑石粉捻一下,以免愈合后看不出來。該法可以編至1~ 9999號,此種方法常在飼養(yǎng)大量動物時作為終身號采用。
常用的大、小鼠染色方法
常用染色劑如下:
(1)3% ~ 5%苦味酸溶液(即2,4,6-三硝基苯酚),因與動物的被毛中的蛋白發(fā)生反應,可染成較為牢固的亮黃色??捎盟部捎靡欢舛鹊囊掖紒砼渲?。
(2)0.5% 中性紅或品紅溶液,可染成紅色。
(3)2%硝酸銀溶液,涂染后在可見光下暴露十分鐘左右可染成咖啡色。
(4)煤焦油乙醇溶液,可染成黑色。
染色法適用于被毛白色的實驗動物,如:大鼠、小鼠等。
涂染方法:
1單色涂染法
單色涂染法是用單一顏色的染色劑涂染實驗動物不同部位的方法。常用的就是苦味酸,或者品紅。也有用苦味酸標雄性,品紅標雌性的。均可。
根據個人習慣及不同實驗室的傳統(tǒng),可有多種不同的編號方法。當前的編號方法可謂林林總總,新的“發(fā)明創(chuàng)造”很多。甚至一個實驗室不同的人做實驗,編號方法完全不一樣。但,在此,我想提醒大家一下:同一個實驗室,標號方法最好統(tǒng)一。眾所周知,藥理實驗一般都是要靠兩個及以上的多人合作才能完成,非常需要協(xié)作精神。而如果參與實驗的人對其中一個的編號方法不熟悉,就可能導致誤拿,或者降低工作效率。因此,統(tǒng)一編號是非常重要的。
在此,我介紹一種本人長期使用的編號方法。這也是《醫(yī)學科研導論》一書中推薦使用的方法。優(yōu)點是:可編1~999之間的號碼,且標志明顯,易學易用,對于統(tǒng)一編號很有參考價值。適合于小鼠、大鼠、豚鼠的編號。
如圖,以小鼠為例。以俯視圖來看,右側為個位,耳朵下表示“1”,右前肢表示表示“2”,右腹側表示“3”,右后肢表示“6”;同樣,左側表示十位,其余與右側一樣;中間表示百位,兩耳之間表示“1”,兩前肢中間表示“2”,背正中表示“3”,尾椎處表示“6”。其余數字由上述數字進行組合,如:4=1+3,5=2+3,7=1+6,8=2+6,9=3+6。但“3”不能由“1+2”來表示,因為本身就有。因此,不可能出現(xiàn)耳朵和前肢同時有標記的現(xiàn)象,也不可能出現(xiàn)在同一側有三處標記的現(xiàn)象。
如:48,則在左側耳下及腹部各標一點,在右側前、后肢各標一點。
我想,大家應不難根據上述規(guī)則讀出下圖最右側圖中標記的小鼠的編號。
此法的優(yōu)點就是清晰易辯,可編號碼數多;缺點就是因涂染點較多,故涂染時要牢固,如不太清晰,隔一定時間要加染。
有人喜歡把每一籠中的動物分別標為1,2,3,4等等。個人覺得這樣不可取。一則,這樣的標號肯定是沒有進行隨機分組的。二則,做實驗時一不小心就全亂套了。
2雙色涂染法
雙色涂染法是采用兩種顏色同時進行染色標記的方法。例如用苦味酸(黃色)染色標記作為個位數,用品紅(紅色)染色標記作為十位數。此法略嫌煩雜。一般不太用。
3直接標號法
直接標號法是使用染色劑直接在實驗動物被毛、肢體上編寫號碼的方法。偶用。
染色法雖然簡單方便,不會給實驗動物造成損傷和痛苦,但是長時間實驗會使涂染劑自行褪色,或由于實驗動物互相嬉鬧、舔毛、摩擦、換毛、糞尿和飲水浸濕被毛等原因,易造成染色標記模糊不清。因而用于慢性實驗時,要注意不斷地補充和加深染色。一般而言,半個月左右加深一次效果不錯。當然,也可以視情況隨時補充。
另外,常用染色劑的毒性對實驗動物的影響也是需要注意的一個問題。
信息來源:丁香通;醫(yī)脈通